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紫外分析儀的原理及其應用
日期：2025-02-05 09:07
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摘要：
紫外分析儀是熒光技術的應用，熒光技術是什么呢？ 先了解下什么是熒光，熒光又作“螢光”，是指種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光（通常是紫外線或X射線）照射，吸收光能后進入激發態，并且立即退激發并發出比入射光的的波長長的出射光（通常波長在可見光波段）；而且旦停止入射光，發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。 知道了什么是熒光，顧名思義就能想到什么是熒光技術。熒光技術是某些物質受定波長的光激發后，在短時間內（10-8秒）會發射出波長大于激發波長的光，這種光稱為熒光。這發光現象在各方面的應用及有關的方法稱為熒光技術（fluorescent technique）。
物質經過紫外線照射后發出熒光的現象可分為兩種情況，第種是自發熒光，如葉綠素、血紅素等經紫外線照射后，能發出紅色的熒光，稱為自發熒光；第種是誘發熒光，即物體經熒光染料染色后再通過紫外線照射發出熒光，稱為誘發熒光。
以往人們常用熒光偏振做指標來研究生物大分子動力學。人們趨于用熒光偏振隨時間的衰減來研究這些問題。在這種方法中，激發光不是連續的面偏振光，而是偏振的光脈沖，因此測得的F∥和F是在兩個不同方向上偏振的熒光隨時間的衰減，它既和熒光壽命τ有關，又與分子在溶液中的運動有關，因此常表示為F∥（t）和F⊥（t）。由它們可得相當重要的物理量——各向異性參數A（t）。由A（t）可推測生物大分子的形狀、分子轉動弛豫時間（即從個定向的狀態到個無定向狀態所要的時間），進而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉動角度和時間之間的函數關系。由這些結果可以研究分子之間的相互作用、分子間結合的緊密程度、蛋白質、核酸分子的解聚程度等等。
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